液相色譜儀基本原理:
是在經典液相色譜法的基礎上,于20世紀60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。與經典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻。因為較小的填充顆粒具有高柱效,但會引起高阻力,需用高壓輸送流動相,故又稱高壓液相色譜。
使用液相色譜時,液體待檢測物被注入色譜柱,通過壓力在固定相中移動,由于被測物種不同物質與固定相的相互作用不同,不同的物質順序離開色譜柱,通過檢測器得到不同的峰信號,后通過分析比對這些信號來判斷待測物所含有的物質。液相色譜作為一種重要的分析方法,廣泛地應用于化學和生化分析中。液相色譜從原理上與經典的液相色譜沒有本質的差別,它的特點是采用了高壓輸液泵、高靈敏度檢測器和微粒固定相,適于分析高沸點不易揮發(fā)、分子量大、不同極性的有機化合物。
液相色譜儀的構造:系統(tǒng)主要由流動相儲液瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),進樣系統(tǒng)要求進樣便利、切換嚴密。同時,由于液體流動相黏度遠遠高于氣體,為了減低柱壓,液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。圖3所示為液相色譜儀的結構示意圖。
液相色譜儀與氣相色譜的比較:
液相色譜所用基本概念:保留值、塔板數、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。
液相色譜所用基本理論:塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致,但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動相,而液體和氣體的性質不相同。此外,液相色譜所用的儀器設備和操作條件也與氣相色譜不同,所以,液相色譜與氣相色譜有一定的差別。