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液相色譜的柱溫升高有哪些解決辦法

更新時(shí)間:2022-10-17        閱讀:2185
  液相色譜柱的損壞70-80%都是由于柱壓升高導(dǎo)致的,色譜柱使用了一段時(shí)間以后,壓力會(huì)有所升高,達(dá)到一定程度以后色譜柱就會(huì)報(bào)廢,如果在一天之內(nèi)壓力升高了2-5個(gè)mpa,或者在幾次使用后壓力就翻倍的升高,這些都是異常狀況,那建議進(jìn)行排除。
  一、色譜柱保存不當(dāng)
  原因:色譜柱如較長時(shí)間不用,重新啟用后需按說明書的活化方法重新活化后再使用,否則也會(huì)出現(xiàn)柱壓升高,柱效下降。
  解決辦法:按說明書重新活化色譜柱。
  原因:除另有規(guī)定外,一般反相色譜柱都需保存在高比例有機(jī)相中,以防止微生物滋生。否則,重新啟用時(shí),會(huì)因微生物滋生而導(dǎo)致柱壓異常升高。
  解決辦法:這種情況,可以嘗試用乙腈-水-TFA=50-50-0.1低流速過夜沖洗色譜柱。
  二、樣品污染
  原因:待檢測(cè)樣品成分復(fù)雜,部分成分死吸附在柱頭端,導(dǎo)致柱壓升高,柱效下降。    6.2 解決辦法
  解決辦法1:中藥項(xiàng)目往往樣品會(huì)比較臟,使用一定時(shí)間后,會(huì)因柱頭污染導(dǎo)致色譜柱性能下降,這種情況下,可將色譜柱反接并按說明書的異常沖洗方法進(jìn)行沖洗。
  解決辦法2:加保護(hù)柱,保護(hù)柱為一種犧牲式攔截污染,有一定的使用壽命。做的過程中關(guān)注柱壓,如柱壓升高10%,則需更換保護(hù)柱芯。有些柱溫箱無法放入保護(hù)柱,則可償試將保護(hù)柱接在柱前,進(jìn)樣品后,但這種情況需對(duì)比不加保護(hù)柱的分析圖譜,確定沒有因保護(hù)柱與檢測(cè)色譜柱的柱溫差異而產(chǎn)生色譜圖差異的情況下,才可以使用。
  解決辦法3:檢測(cè)樣品建議采用小孔徑的濾頭或?yàn)V膜(如0.22μm)進(jìn)行過濾后再進(jìn)樣,以盡量減少污染物進(jìn)入色譜柱。
  解決辦法4:定期維護(hù)色譜柱(確認(rèn)為樣品污染導(dǎo)致柱效下降,而不是填料塌陷的):對(duì)于確認(rèn)是樣品污染導(dǎo)致色譜柱使用一段時(shí)間柱效下降的,建議對(duì)該項(xiàng)目使用的色譜柱反接后按說明書的異常再生方法進(jìn)行定期維護(hù);這種處理的好處是,能減少柱子污染物聚集,延長色譜柱使用壽命。
  當(dāng)一根柱子經(jīng)過異常再生后,性能參數(shù)仍無法滿足檢測(cè),說明色譜柱已接近壽命,這種情況下,可以將柱子反接檢測(cè),還能再用一段時(shí)間。
  檢測(cè)蛋白類樣品,容易因蛋白聚集導(dǎo)致柱壓升高,柱效下降,這種情況,可以用乙腈-水-TFA=50-50-0.1低流速過夜沖洗色譜柱。
  三、其他原因
  仔細(xì)檢查系統(tǒng)及操作,根據(jù)具體的原因采取相應(yīng)的措施。

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